随着生物技术与多肽合成技术的日臻成熟，越来越多的多肽药物被开发并应用于临床。因适应症广、安全性高且疗效显著，多肽药物已广泛应用于肿瘤、肝炎、糖尿病、艾滋病等疾病的预防、诊断和治疗，具有广阔的开发前景[1]。在多肽药物的制备方法中，固相合成法具有产率较高且能够实现自动化等优点。然而，其缺点也十分明显，即每步中间产物不能纯化，且最终产物必须经过可靠的分离手段进行纯化。常用的多肽分离纯化方法包括离子交换色谱法（IEC）和反相高效液相色谱法（RP-HPLC）等，这些方法存在样品载量低、分离介质价格昂贵、分离设备复杂且成本高昂等缺点。本文以胸腺五肽为样品，通过SepaFlash Bio C18反相柱与SepaBean machine联用，成功地实现单次进样即可获得高纯度（>94%）的多肽产品，为此类小分子多肽样品的分离纯化提供了一种高效、快速且成本低廉的解决方案。